تحقیق و توسعه
خرید ویتامین کشت بافت بدون واسطه | قیمت تولیدکننده
در کشت بافت گیاهی، موفقیت یک پروتکل فقط به انتخاب هورمون رشد، عناصر معدنی یا محیط پایه وابسته نیست. سلولها و بافتهای گیاهی در شرایط In Vitro در محیطی مصنوعی رشد میکنند و برای حفظ فعالیتهای متابولیکی، رشد و تقسیم سلولی به مجموعهای از ترکیبات آلی نیز نیاز دارند. ویتامینهای کشت بافت بخشی از این ترکیبات هستند و اگرچه معمولاً در مقادیر بسیار کمتری نسبت به نمکهای ماکرو در محیط استفاده میشوند، انتخاب نوع، خلوص و غلظت صحیح آنها اهمیت زیادی دارد.
در دسته ویتامینهای کشت بافت فردوس تجهیز میتوانید ترکیباتی مانند تیامین هیدروکلراید B1، نیکوتینیک اسید B3، پیریدوکسین هیدروکلراید B6، میواینوزیتول و اسید اسکوربیک را بررسی کنید. گلیسین نیز اگرچه از نظر شیمیایی یک آمینواسید است، در بسیاری از فرمولهای متداول ویتامینی کشت بافت در کنار ویتامینها قرار میگیرد و به همین دلیل در این گروه محصولات دیده میشود.
ویتامین کشت بافت چیست؟
ویتامینهای کشت بافت ترکیبات آلی هستند که به فرمول محیطهای کشت گیاهی اضافه میشوند و میتوانند در مسیرهای متابولیکی و فعالیتهای آنزیمی سلول نقش داشته باشند. نوع و مقدار آنها به محیط پایه و پروتکل کشت بستگی دارد و نمیتوان یک فرمول ثابت را برای همه گونهها، ریزنمونهها و مراحل کشت توصیه کرد.
برای مثال، محیط Murashige and Skoog یا MS یکی از شناختهشدهترین محیطهای کشت گیاهی است. نسخه استاندارد ویتامین MS شامل تیامین، نیکوتینیک اسید، پیریدوکسین، میواینوزیتول و گلیسین است. محیط Gamborg B5 نیز از تعدادی ترکیب مشابه استفاده میکند، اما نسبت و غلظت آنها با MS یکسان نیست.
FAO نیز در منابع کشت بافت گیاهی به حضور میواینوزیتول، نیکوتینیک اسید، پیریدوکسین HCl و تیامین HCl در محیطهایی مانند MS اشاره میکند و تیامین را یکی از ترکیبات مهم برای بسیاری از سلولهای گیاهی معرفی میکند.
مهمترین ویتامینهای مورد استفاده در کشت بافت گیاهی
تیامین هیدروکلراید B1
تیامین هیدروکلراید یا ویتامین B1 یکی از شناختهشدهترین ترکیبات آلی در فرمولهای کشت بافت گیاهی است. این ماده در محیطهای مختلف حضور دارد، اما مقدار مصرف آن ثابت نیست.
برای مثال، در فرمول استاندارد MS مقدار تیامین HCl برابر با 0.1 mg/L است، در حالی که در فرمول ویتامینی Gamborg مقدار آن به 10 mg/L میرسد. همین اختلاف نشان میدهد که هنگام خرید تیامین نباید صرفاً به نام «ویتامین B1» اکتفا کرد؛ محیط مورد استفاده و فرمول پروتکل باید مشخص باشد.
فردوس تجهیز در حال حاضر تیامین هیدروکلراید را در گزینههایی از Sigma و GBG عرضه میکند.
نیکوتینیک اسید B3
نیکوتینیک اسید یا Niacin یکی دیگر از اجزای متداول برخی محیطهای کشت گیاهی است. در نسخه استاندارد ویتامین MS مقدار 0.5 mg/L نیکوتینیک اسید وجود دارد، در حالی که فرمول Gamborg آن را در غلظت 1 mg/L استفاده میکند.
نکته مهم برای سایت فردوس تجهیز این است که توضیح نیکوتینیک اسید در این صفحه نباید روی کاهش کلسترول یا کاربرد انسانی ویتامین B3 تمرکز کند. کاربری که وارد این Category شده به دنبال ماده آزمایشگاهی برای کشت بافت گیاهی است، نه مکمل تغذیهای. در حال حاضر توضیح Product Card این محصول هنوز به LDL و HDL اشاره دارد و بهتر است آن محتوا نیز بازنویسی شود.
پیریدوکسین هیدروکلراید B6
پیریدوکسین هیدروکلراید B6 نیز در فرمولهای شناختهشده محیط کشت استفاده میشود. Sigma برای هر دو فرمول MS و Gamborg این ماده را ذکر میکند، اما غلظت استاندارد آن در MS برابر 0.5 mg/L و در Gamborg برابر 1 mg/L است.
در فردوس تجهیز پیریدوکسین هیدروکلراید Sigma با خلوص اعلامشده 98 درصد HPLC در این گروه محصولات قرار دارد.
هنگام سفارش باید به نام کامل ترکیب و فرم شیمیایی آن دقت شود. اگر پروتکل Pyridoxine HCl را مشخص کرده است، نباید فرم دیگری صرفاً به دلیل مشابه بودن نام جایگزین شود مگر اینکه محاسبات و سازگاری آن بررسی شده باشد.
میواینوزیتول
Myo-Inositol از نظر طبقهبندی دقیق شیمیایی یک ویتامین کلاسیک نیست، اما بهطور سنتی در فرمولاسیون محیطهای کشت گیاهی در کنار ویتامینها قرار میگیرد و مقدار آن معمولاً بهمراتب بیشتر از تیامین، نیکوتینیک اسید یا پیریدوکسین است.
در محلول استاندارد ویتامین MS و Gamborg، مقدار میواینوزیتول 100 mg/L ذکر شده است.
فردوس تجهیز در حال حاضر میواینوزیتول مناسب Plant Cell Culture را از برندهای Sigma و GBG در این دسته ارائه میکند.
اسید اسکوربیک یا ویتامین C
اسید اسکوربیک برخلاف تیامین یا پیریدوکسین جزء ثابت نسخه استاندارد MS نیست. با این حال، این ماده در برخی فرمولها و پروتکلهای کشت گیاهی بهعنوان ترکیب آنتیاکسیدانی استفاده میشود. Sigma نیز L-Ascorbic Acid را در بعضی فرمولهای تخصصی ویتامین کشت بافت، مانند Kao and Michayluk، فهرست کرده است.
بنابراین اسید اسکوربیک نباید بهصورت خودکار به هر محیطی اضافه شود. نوع گیاه، مشکل مورد نظر و پروتکل پژوهشی باید مبنای تعیین مقدار مصرف قرار گیرد.
گلیسین
گلیسین ویتامین نیست و یک آمینواسید است؛ اما حضور آن در این دسته از نظر فرمولاسیون محیط کشت قابل توجیه است. فرمول استاندارد ویتامین MS شامل 2 mg/L گلیسین است.
در صفحه فعلی فردوس تجهیز نیز نمونههایی از گلیسین Merck و GBG عرضه شدهاند. توضیح محصول بهتر است به کاربرد آزمایشگاهی و حضور گلیسین در محیطهای کشت بپردازد و از توضیحات گسترده درباره عملکرد این آمینواسید در بدن انسان فاصله بگیرد.
تفاوت ویتامینهای MS و Gamborg B5 چیست؟
یکی از مهمترین نکاتی که هنگام خرید ویتامین کشت بافت باید در نظر گرفته شود این است که نام مشترک ترکیبات به معنی غلظت یکسان آنها نیست.
طبق فرمولهای منتشرشده توسط Sigma و PhytoTech، غلظت نهایی تعدادی از ترکیبات رایج به این شکل است:
| ترکیب | MS | Gamborg B5 |
|---|---|---|
| میواینوزیتول | 100 mg/L | 100 mg/L |
| نیکوتینیک اسید | 0.5 mg/L | 1 mg/L |
| پیریدوکسین HCl | 0.5 mg/L | 1 mg/L |
| تیامین HCl | 0.1 mg/L | 10 mg/L |
| گلیسین | 2 mg/L | در Vitamin Mix استاندارد Gamborg ذکر نشده |
اختلاف 100 برابری مقدار تیامین بین دو فرمول نمونه خوبی است که نشان میدهد انتخاب مواد باید از روی فرمول محیط کشت انجام شود، نه از روی یک لیست عمومی ویتامینها.
هنگام خرید ویتامین کشت بافت به چه مشخصاتی توجه کنیم؟
برای یک آزمایشگاه تحقیقاتی یا مجموعه تکثیر تجاری، قیمت تنها یکی از معیارهای خرید است. مشخصات محصول باید با پروتکل پروژه همخوانی داشته باشد.
مهمترین موارد عبارتاند از:
- گرید محصول: در صورت نیاز پروژه، محصول مناسب Plant Cell Culture یا کاربرد آزمایشگاهی انتخاب شود.
- خلوص: درصد خلوص و روش آزمون اعلامشده مانند HPLC یا TLC بررسی شود.
- برند و Product Number: در آزمایشهای قابل تکرار، ثبت دقیق سازنده و شماره کاتالوگ اهمیت دارد.
- COA و Lot Number: برگه آنالیز امکان بررسی مشخصات همان Batch محصول را فراهم میکند.
- فرم شیمیایی: عباراتی مانند Thiamine HCl و Pyridoxine HCl باید دقیقاً با پروتکل تطبیق داده شوند.
- شرایط نگهداری: دمای نگهداری پودر، محلول Stock و محصول آماده ممکن است متفاوت باشد.
- وزن بستهبندی: به دلیل مصرف کم بسیاری از ویتامینها، بسته بزرگتر الزاماً انتخاب اقتصادیتری نیست.
محصولات حرفهای کشت بافت نیز معمولاً همراه اطلاعاتی مانند شکل فیزیکی، حلالیت، دمای نگهداری، Product Number و COA ارائه میشوند. PhytoTech برای محیطهای کشت خود چنین اطلاعاتی را بهصورت Lot-specific منتشر میکند.
محلول Stock و نگهداری ویتامینهای کشت بافت
از آنجا که بسیاری از ویتامینها در مقادیر بسیار کم استفاده میشوند، در آزمایشگاه معمولاً تهیه محلول Stock میتواند خطای وزنکشی در هر بار ساخت محیط را کاهش دهد؛ البته غلظت Stock باید دقیقاً از روی فرمول آزمایشگاه محاسبه شود.
Sigma محلولهای تجاری Vitamin Mix را به شکل 1000X نیز عرضه میکند. در دستور این شرکت، برخی محلولهای آماده بهصورت Sterile-Filtered ارائه میشوند و با مقدار مشخصی به محیط نهایی اضافه میشوند. همچنین پودرهای Vitamin Mix میتوانند رطوبتگیر باشند و باید از رطوبت محیط محافظت شوند.
اما نمیتوان یک روش نگهداری یا استریلسازی را برای همه محصولات فردی تعمیم داد. برچسب، SDS، دیتاشیت و دستور سازنده همان ماده باید مرجع اصلی باشد.
قیمت ویتامین کشت بافت چگونه تعیین میشود؟
قیمت ویتامین کشت بافت به نوع ترکیب، برند، گرید، درصد خلوص، وزن بستهبندی، کشور سازنده و شرایط تأمین وابسته است. برای مثال، دو محصول با عنوان تیامین B1 ممکن است از نظر برند، خلوص، روش آنالیز، Grade و حجم بستهبندی متفاوت باشند و در نتیجه مقایسه قیمت آنها بدون بررسی مشخصات فنی صحیح نیست.
در محصولات فعلی فردوس تجهیز نیز برای بعضی ترکیبات گزینههای متفاوت Sigma، GBG و Merck دیده میشود.
اگر پروتکل مشخصی دارید، بهتر است هنگام استعلام قیمت نام دقیق ماده، برند یا گرید مورد نظر، مقدار مورد نیاز و محیط کشت مورد استفاده را مشخص کنید.
خرید ویتامین کشت بافت از فردوس تجهیز
در فردوس تجهیز امکان بررسی و سفارش مجموعهای از ترکیبات مورد استفاده در محیط کشت گیاهی از جمله تیامین B1، نیکوتینیک اسید B3، پیریدوکسین B6، میواینوزیتول، اسید اسکوربیک و گلیسین فراهم شده است. بسته به محصول، گزینههایی از برندهای Sigma، GBG و Merck در سایت دیده میشود.
برای انتخاب دقیقتر، بهتر است قبل از خرید فرمول محیط کشت خود را بررسی کنید. اعلام نام محیط مانند MS یا B5، غلظت مورد نیاز، مقدار مصرف و مشخصات ماده باعث میشود محصولی انتخاب شود که با فرآیند واقعی آزمایشگاه مطابقت داشته باشد.
در کشت بافت، تفاوت میان «یک ویتامین با نام مشابه» و «مادهای با فرم، خلوص و گرید صحیح» میتواند برای تکرارپذیری آزمایش مهم باشد؛ بنابراین انتخاب محصول بهتر است از روی مشخصات فنی انجام شود، نه فقط قیمت.
سوالات متداول
مهمترین ویتامینهای کشت بافت گیاهی کداماند؟
تیامین HCl، نیکوتینیک اسید و پیریدوکسین HCl از ترکیبات رایج هستند و میواینوزیتول نیز معمولاً در کنار آنها استفاده میشود. ترکیب نهایی به فرمول محیط بستگی دارد.
آیا ترکیب ویتامینهای MS و B5 یکی است؟
خیر. تعدادی از مواد مشترکاند، اما غلظت آنها متفاوت است. برای نمونه مقدار استاندارد تیامین در Vitamin Mix فرمول Gamborg بسیار بیشتر از MS است.
آیا گلیسین ویتامین است؟
خیر. گلیسین یک آمینواسید است، اما در فرمول استاندارد Vitamin Mix محیط MS در کنار ویتامینها قرار دارد.
آیا میتوان از ویتامین خوراکی برای کشت بافت استفاده کرد؟
برای کشت بافت باید مشخصات، خلوص و Grade ماده با پروتکل آزمایشگاهی سازگار باشد. محصولات حرفهای Plant Tissue Culture با مشخصات و کنترل کیفی متناسب با کاربرد آزمایشگاهی عرضه میشوند.
ویتامینهای کشت بافت را چگونه نگهداری کنیم؟
شرایط نگهداری به ماده و فرم محصول بستگی دارد. برای مثال Sigma بعضی Vitamin Mixهای آماده خود را در شرایط سرد نگهداری میکند، اما برای هر محصول باید دیتاشیت همان سازنده بررسی شود.